Яка мета електрофорезу денатуруючого гелю?

Денатуруючий гель-електрофорез (SDS-PAGE) є найпоширенішим аналітичним методом для оцінки чистоти білка. У наведених вище протоколах використовується система «міні-гель», яка дозволяє швидко аналізувати чистоту з використанням невеликих кількостей (~10 мкл, що містить ~1–10 мкг білка).

Швидкість міграції нативних білків крізь просіювальне середовище є, отже, більшою мірою відображенням їх відносної компактності, а менш точною мірою молекулярної маси. Денатурація білків зводить нанівець структурний вплив на мобільність, дозволяючи розділяти на основі справжнього співвідношення заряд/маса.

Денатурація ДНК – це процес поділ дцДНК на окремі ланцюги, які є сприятливими для гібридизації ДНК. Незважаючи на те, що денатурація є ключовою реакцією, яка визначає успіх біотестів на основі гібридизації ДНК, досі не було зроблено жодних спроб систематично охарактеризувати метод денатурації дцДНК.

Оскільки навіть зміни однієї пари основ у послідовності ДНК можуть впливати на Tm домену плавлення, DGGE може бути потужним методом виявлення мутацій. Його використання включає в себе ідентифікація видів у клінічній мікробіології, виявлення мутацій у зразках тканин та екологічна мікробіологія.

У нативному гель-електрофорезі зацікавлена ​​РНК або білок зберігається у своїй нормальній або нативній структурі під час проходження через гель. При денатуруючому гель-електрофорезі до зразка, гелю або буфера до або під час гель-електрофорезу додають відновник.

Денатуруючий гель-електрофорез (SDS-PAGE) є найпоширенішим аналітичним методом для оцінки чистоти білка. У наведених вище протоколах використовується система «міні-гель», яка дозволяє швидко аналізувати чистоту з використанням невеликих кількостей (~10 мкл, що містить ~1–10 мкг білка).

Оцініть статтю